组织芯片免疫荧光IF单标（TSA法）

服务介绍：

多重免疫标记技术（mIHC）是近年来病理学研究领域中兴起的一项重要技术方法，该方法是一项基于酪胺信号放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）的多重顺次免疫染色技术，可以在细胞或组织样本原位上检测多个目标靶点，通过这些靶点的组合和位置关系的研究，进而阐明其相互作用机理。该技术不仅可大幅提高被检测信号的灵敏度，同时也可解决在同一张切片上进行多种同种属生物标志物检测的难题，通过定量病理分析可获组织细胞原位各种靶标类别、组分、表达量等信息，各靶标及其相互作用的空间定位、定性和定量等信息，全面、系统、直观、科学地解析这些信息对于研究疾病的发生发展机制，对于探讨疾病诊断和治疗疾病的有效方法有着重要的意义。

本项目通过TSA法，在一张芯片上对一个抗原进行标记，通常可标记红光或绿光，细胞核用DAPI标记。

主要用途：

1、原位展示及定量分析双重优势。

2、更全面的分析：药物靶点和肿瘤微环境同时分析。

3、不同靶点自由组合，多靶标共定位染色，也可拆分信号。

4、展示空间位置关系，区分不同细胞亚群。

检测原理：

在过氧化氢存在时，一些酶如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等可以催化一种酪胺的底物为一种非常活跃的短寿命中间体，在短时间内，中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物，由于相接的蛋白（如HRP，抗体，目标抗原）都含有大量的酪氨酸结合位点，因此会富集大量信号，使信号被有效放大。

实验流程：

脱蜡与水化-抗原修复-灭活内源性过氧化物酶-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-标记荧光素-洗脱-DAPI染核-封片-显微镜镜检。

样本要求及运输条件：

1、提供固定合格的样本。组织离体后，选择合适的固定液立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，新鲜标本用合适的容器固定24-48h，大标本固定12h，再切开固定。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。