组织芯片免疫荧光IF四标（TSA法）

服务介绍：

多重免疫标记技术（mIHC）是近年来病理学研究领域中兴起的一项重要技术方法，该方法是一项基于酪胺信号放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）的多重顺次免疫染色技术，可以在细胞或组织样本原位上检测多个目标靶点，通过这些靶点的组合和位置关系的研究，进而阐明其相互作用机理。该技术不仅可大幅提高被检测信号的灵敏度，同时也可解决在同一张切片上进行多种同种属生物标志物检测的难题，通过定量病理分析可获组织细胞原位各种靶标类别、组分、表达量等信息，各靶标及其相互作用的空间定位、定性和定量等信息，全面、系统、直观、科学地解析这些信息对于研究疾病的发生发展机制，对于探讨疾病诊断和治疗疾病的有效方法有着重要的意义。

本项目通过TSA法，可以突破一抗来源的限制，在一张组织芯片上对四个抗原进行标记，无需考虑一抗来源是否相同。

主要用途：

1、原位展示及定量分析双重优势。

2、更全面的分析：药物靶点和肿瘤微环境同时分析。

3、不同靶点自由组合，多靶标共定位染色，也可拆分信号。

4、展示空间位置关系，区分不同细胞亚群。

检测原理：

在过氧化氢存在时，一些酶如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等可以催化一种酪胺的底物为一种非常活跃的短寿命中间体，在短时间内，中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物，由于相接的蛋白（如HRP，抗体，目标抗原）都含有大量的酪氨酸结合位点，因此会富集大量信号，使信号被有效放大。

实验流程：

严格的TSA法多色免疫荧光实验设计：

1、IHC免疫组化预实验 - 验证抗体 - 客户确认结果。

2、IF免疫荧光单标预实验（TSA法） - 验证浓度及颜色搭配调整优化 - 客户确认结果（表达丰度）。