组织芯片构建后,免疫组化实验的关键在于标准化的“一抗孵育”流程。首先,需将TMA蜡块切为3-5微米薄片,贴附于阳离子防脱载玻片,并确保切片完整无气泡。实验时,将整张TMA玻片同时进行脱蜡、水化及抗原修复,这是保证所有芯点反应条件均一的物理基础。随后使用疏水笔圈定阵列区域,滴加足量一抗,确保每个组织芯点被完全覆盖且避免边缘干燥。严格在湿盒中4℃过夜或37℃恒温孵育,是实验成功的关键。后续的检测系统与显色步骤也必须在同一条件下完成,最终通过全片扫描设备一次性采集图像,从而实现对上百个样本的平行比色分析。