Q
在构建组织芯片时,如何确保供体蜡块中的组织芯在取样和包埋过程中不发生移位或脱落?
A
确保供体蜡块中组织芯的稳定性,关键在于对蜡块物理性质的精准控制。供体蜡块需使用熔点适宜(通常为56–58℃)且纯度高的石蜡,避免因蜡质过脆或过软导致打孔时芯柱断裂或松散。取样前,必须对蜡块表面进行平整处理并轻微加热,使表层蜡略微软化,这能提供足够的粘附力,使空心针旋转钻取时,组织芯能牢固地附着在针芯内壁,而非直接滑脱。
在将组织芯转移至受体蜡块时,精确的深度控制和同步加热至关重要。打孔针钻入受体蜡块的深度应与组织芯长度严格匹配,受体蜡块的预钻孔也需轻微预热。当载有组织芯的针推入受体孔洞时,针体摩擦产生的微热以及周围蜡质的瞬间融合,能形成一个无缝的蜡-蜡结合界面。最后,将完成点阵的受体蜡块在37℃恒温箱中孵育15–30分钟,使所有组织芯与周围石蜡充分融合成一个整体,这能从根本上防止后续切片时因剪切力导致的移位或脱落。
