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上海威奥生物组织芯片多重荧光免疫组化（mIHC）实验服务是一种高效、高通量的技术，可同时检测同一组织样本中多种靶标蛋白的表达和空间分布，广泛应用于肿瘤微环境、免疫细胞浸润、药物靶点验证等研究。
1.用于形态学的比较研究:将各种不同的组织器官集中在一个组织芯片上，进行比较研究。
2.用于各种免疫组织化学染色、原位杂交、原位PCR、荧光原位杂交、原位RT-PCR和.核苷酸启动的DNA合成(PRINS)等原位组织学实验。
3.用于临床和基础的研究，如分子诊断、预后指标筛选、治疗靶点定位、抗体和药物筛选、基因和表达分析等。
4.医学研究中主要应用组织芯片技术进行肿瘤的组织学研究。
上海威奥生物现自有组织芯片超百余种，并可代做或按要求定制组织芯片，具体需求请后台详询技术老师。
研究者一次可有效利用成百上千份自然或出于疾病状态下的组织标本来研究特定基因及其所表达的蛋白质与疾病之间的关系, 对于疾病的分子诊断,预后指标和治疗靶点的定位, 抗体和药物的筛选等方面均有十分重要的实用价值。
2.按照实验目的设计组织芯片阵列组织类型和排列方式
3.根据复诊标记及阵列设计选择对应的组织病例编号;
4.按照组织病例编号从组织库中取出组织蜡块和对应的 HE染色切片;
6.按照阵列设计利用组织阵列仪抽提病理蜡块组织芯并有规律的排列在空白受体蜡块上, 制备组织阵列块;
7.组织阵列块在52C恒温烤箱中加热融合, 使组织芯与受体蜡块紧密融合;
8.全自动组织切片机以20μuml转的进刀速度对组织阵列块修整蜡块, 直至80%的 组织芯完全曝露;
10.组织芯片沥干水分后, 置于60 ℃恒温烤箱中烤片 16个小时;
11.组织芯片按编号每隔20张抽取一张作HE染色;
12.病理医生对抽检组织芯片中每一个组织样本进行复诊质检, 结果由信息部输入 组织芯片数据库;
13.组织芯片白片敷蜡后, 置于冰箱4 ℃冷藏室保存。
1. 样本准备：
1) 石蜡切片：依次将切片放入二甲苯Ⅰ（15min） -二甲苯Ⅱ（15min）-无水乙醇Ⅰ（5min）-无水乙醇Ⅱ（5min）-95%乙醇 （5min）-85%乙醇 （5min）-75%乙醇 （5min） ，蒸馏水洗。
2) 冰冻切片：冰冻切片固定10-30min，PBS 洗 5min，重复 3 次，滴加 0.3% triton-X100 破膜液通透 20min，PBS 洗 5min ，重复 3 次。
3) 细胞爬片或者细胞涂片：细胞样本固定10-30min ，PBS 洗 5min 重复 3 次，滴加 0.3% triton-X100 破膜液通透 20min ，PBS 洗 5min ，重复 3 次。
2.抗原修复
组织切片置于盛满碱性抗原修复液AR9或者柠檬酸修复液AR6的修复盒中于微波炉内进行抗原修复（也可以用高压 1-2min；100度，水煮15min或95度水浴20min等其他热修复方法）。中火8min，停火8min，转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
3. 阻断内源性过氧化物酶：
切片放入3%过氧化氢溶液，室温避光孵育15min，将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
4. 非特异性靶点封闭:
切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内滴加用抗体稀释液（或者其他封闭液3%BSA或者山羊血清）均匀覆盖组织，室温封闭30min。
5. 加一抗：
轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加用抗体稀释液稀释好的一抗，切片平放于避光湿盒内 4℃孵育过夜或者37℃ 1-2h（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）；
6.加HRP多聚物二抗：
玻片置于PBS（PH7.4） 中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的HRP多聚物耦联二抗覆盖组织，避光室温孵育50min，PBS 洗三次。
7.TSA荧光染料反应液反应：
浓缩型荧光染料与TSA buffer按照 1:50~1:200的比例混合均匀，切片滴加配好的TSA荧光染料反应液均匀覆盖组织室温反应1~15min（最佳时间5min-10min），PBS洗三次（预实验可先染1min洗干净荧光染料后显微镜下观察染色效果，如果阳性弱继续滴加荧光染料加强染色强度直至合适强度后继续进行下一步）。
8. 抗体洗脱：
石蜡切片置于抗原修复液中95度水浴25-40min（根据不同抗体亲和力灵活调整时间）或者滴加适量37度预热至完全溶解的mIHC专用抗体洗脱液（冰冻切片 爬片 骨组织建议用）覆盖样本，37度放置5-20min，弃去洗脱液，再次滴加适量抗体洗脱液覆盖样本37度放置5-20min，弃洗脱液，PBS洗三次，每次5min（石蜡切片可用热修复洗脱或者抗体洗脱液洗脱，细胞及冰切切片需用抗体洗脱液进行洗脱）
重复3-8 步骤 （换用另外一种WH-XXXPLus 荧光染料）
---第二轮标记
重复3-8 步骤（换用另外一种 WH-XXXPLus 荧光染料）
---第N轮标记
重复3-7 步骤（换用另外一种WH-XXXPLus 荧光染料）
---最后一轮标记
9. DAPI 复染细胞核：
玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI即用型染液，避光室温孵育5min-20min。
10.封片：
玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3 次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭剂封片。
11.镜检拍照：
切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图像。
病理图像定量分析的必需工具，广泛应用于免疫学、肿瘤学、毒理病理学等领域研究超强大空间分析功能，深入分析挖掘多重荧光免疫组化图像中多维度空间信息。
·连续切片叠加分析功能，突破单切片标记物数目限制，提供另类超多标分析思路
·TMA 分割模块，支持多样本来源组织芯片图像研究
·TLS 分析功能，助力科研前沿三级淋巴结构的识别与分析
·可针对特殊科研需求提供定制化功能开发。
·高精度强训练Al模型，精准划分区域并识别细胞，省去人工参数设置繁琐步骤
·TMA 区域自动分割无需手动拆分cores
·TLS自动识别，省去人工标记
荧光定量
IHC定量
区域分割
共表达分析
定量热图展示
1.将扫描软件导入分析软件，读取相应的图像；
2.利用TMA模块功能将组织芯片各芯点按照行、列分割图像，每个core单独一张图像；
3.采用软件荧光场定量分析模块，各个荧光通道设置合理的阳性阈值，进行细胞的定量和定量分析；
4.根据自动识别表型功能，进行所有表型设置；
5.输出分析数据，整理报告；
6.后处理模块：邻近距离分析、空间浸润分析、空间hub分析、T-SNE分析等。
经上海市有关部门批准，公司建立了近1500㎡的GMP标准化生产车间、研发中心、标准化的实验服务检测中心，是为数不多的既有研发生产中心，又有实验检测中心的高科技生物公司。
公司有生产资质；生产车间可参观，产品可OEM。
公司还有实验检测资质；是一家正规合法、持证接单的第三方科研服务检测机构。欢迎有合作诚意的公司洽谈合作。
