组织芯片网
始于高标准 FFPE 样本前处理。
固定、脱水、蜡块保存、HE 定位、打孔规格……
一步不规范，
IHC、Nanostring DSP 等后续检测全受牵连。
收好这份实操指南，
让你的TMA 一次成功，不返工！
一
目的
规范组织芯片（Tissue Microarray, TMA）送样指南，保证阵列位点完整、组织形态完好、抗原保存稳定，适用于后续 IHC、IF、PLA、原位杂交和 Nanostring DSP等实验。
二 适用范围 三 组织固定要求 组织离体与修剪规范 组织离体至固定的时间间隔不得超过 30 分钟，需尽快完成固定。 组织修剪标准尺寸： 1 cm×1 cm×0.2～0.3 cm；
最大允许尺寸： 1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm；
组织厚度严格控制在1 mm～3 mm。 组织过厚 固定与脱水不充分，影响后续切片质量。
组织过薄 易出现脱水与浸蜡过度、组织脆性增加，打孔取芯时易碎裂、打穿，修块与切片过程中易发生靶组织缺失、位点空洞。 肿瘤样本取材规范 肿瘤样本需同时包含癌组织区域、癌旁正常组织区域、交界区域；
取材时避开大片坏死、出血、钙化区域，剔除缝线、异物、严重脂肪空泡及挤压撕裂组织；
组织切面保持平整，避免褶皱、卷曲、挤压及撕裂损伤。 固定液选择与体积要求 推荐使用10% 中性福尔马林（10% NBF） 或4% 多聚甲醛（4% PFA）；
其中10% NBF 固定穿透力更强，4% PFA 穿透力相对较弱； 固定液体积应为组织块体积的10～20 倍， 保证组织充分固定。
固定时间控制 固定时间依据组织块大小调整，直径 0.5 cm 组织块固定时间为 18～24 小时；
固定时间不得超过 48 小时，超时将导致抗原遮蔽、RNA 降解，影响下游实验。 四 FFPE 蜡块要求 ——如果送的样本为蜡块样本 组织固定 需符合「三」中的要求; 存放条件 将蜡块放入干燥器中，保持干燥环境，室温保存； 蜡块年龄 小于 3 年的蜡块 Nanostring 做过实验验证没有问题，3-10 年的蜡块Nanostring 项目做过类似服务可以得到比较理想结果，超过 10 年的蜡块需要客户自行验证蛋白与RNA 的完整性。 蜡块质量 石蜡致密无空洞、无裂纹、无发白粉化。组织与蜡结合紧密，无脱裂、无空鼓。蜡块表面平整，无凹陷、无溢蜡过厚。 五 HE复诊 做 TMA 前必须先切 HE 片染色：定位靶点、确认组织结构完好，再上机打孔。
每例供体蜡块常规切片、裱片、HE 染色。
病理镜下或扫描成像确认：癌区、癌旁、
正常组织、病变靶点位置。
用记号笔在蜡块表面精准圈定目标取材区域，避开坏死、钙化、出血区。
六
组织芯片排布 & 打孔常用规格
常用孔径：1.0 mm / 1.5 mm / 2.0 mm；
2.0 mm直径，5行*13列--65芯
——大病灶、需更多细胞量
1.5mm直径，8行*18列--144芯
——最通用、常规临床样本首选
1.0mm直径，10行*22列--220芯
——微小病灶、穿刺标本、小动物组织、样本数量多阵列
每例建议至少2～3 个复孔，减少位点缺失，满足统计学要求。
七
Nanostring DSP 专属规格
——贴片区域是35.3mm*14.1mm
2.0 mm直径，5行*13列--65芯
1.5mm直径，6行*17列--102芯
1.0mm直径，8行*20列--160芯
八
送样要求
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样本类型 |
运输方式 |
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组织样本 |
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放固定液后即可寄出（不需要 等固定完再送），常温运输 |
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石蜡组织块 |
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常温干燥避光运输，防震打包 |
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石蜡组织切片 |
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密封干燥，加冰袋，4℃冷藏 运输，防震打包 |
九
注意事项
新鲜组织固定超时 / 固定液不对 → 抗原报废；
蜡块粉化、开裂、组织空鼓 → 打孔掉芯、脱片；
没有先 HE 复诊就直接打孔 → 打不到病灶、
位点无效；
组织过厚 / 过薄 → 脱水不佳、阵列高低不平
老旧多年蜡块强行做 TMA → 染色普遍无信号、
背景极高；
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